Research Article

Prevalence, morphological and molecular characterization of Leucocytozoon macleani (Apicomplexa: Haemosporida) from chickens in Thailand

Prévalence, caractérisation morphologique et moléculaire de Leucocytozoon macleani (Apicomplexa : Haemosporida) chez les poulets en Thaïlande

¹ Department of Animal Science, Faculty of Natural Resources, Rajamangala University of Technology Isan, Sakon Nakhon, 47160, Thailand
² State Scientific Research Institute Nature Research Centre, Vilnius, 08412, Lithuania
³ Department of Infectious Diseases and Public Health, Jockey Club College of Veterinary Medicine and Life Sciences, City University of Hong Kong, Hong Kong Special Administrative Region, PR China
⁴ Akkhraratchakumari Veterinary College, Walailak University, Nakhon Si Thammarat, 80160, Thailand
⁵ Informatics Innovation Center of Excellence, Walailak University, Nakhon Si Thammarat, 80160, Thailand
⁶ One Health Research Center, Walailak University, Nakhon Si Thammarat, 80160, Thailand

^* Corresponding author: pp.vettech@gmail.com

Received: 17 April 2025
Accepted: 9 July 2025

Abstract

Leucocytozoon species are common in countries with warm climates but are an often neglected blood parasite in poultry. Although Leucocytozoon macleani is less virulent than Leucocytozoon caulleryi, it can still negatively impact production performance. In Thailand, the available reports indicate a high prevalence of Leucocytozoon spp., but detailed morphological characteristics of the parasites remain insufficiently known. In this study, Giemsa-stained blood smears and extracted genomic (g) DNA were obtained from 60 domestic chickens (Gallus gallus domesticus). Blood smears were examined for the presence of Leucocytozoon species and their morphological characteristics were examined. A total of 60 gDNA samples were used for nested-PCR amplification of the cytochrome b gene of Leucocytozoon species, followed by sequencing and phylogenetic analysis. The microscopic and molecular examinations revealed prevalence of leucocytozoonosis in chickens of 85% and 90%, respectively. Sequence analysis indicated that several infected chickens harboured multiple Leucocytozoon lineages. Leucocytozoon macleani was morphologically identified in nine samples and could be linked to the lineages GALLUS17, GALLUS34, and the new lineages GALLUS63. The found gametocytes of L. macleani morphologically resembled those reported previously, but exhibited some distinct characteristics. Phylogenetically, the lineages of L. macleani isolated in this study grouped separately from some other L. macleani lineages deposited in GenBank. In conclusion, the prevalence of Leucocytozoon infection in chickens from Northeastern Thailand was high, with frequent co-infections by multiple lineages. Leucocytozoon macleani may exhibit cryptic specification. This study is the first report of L. macleani lineages described using MalAvi database nomenclature, alongside their morphological characteristics.

Résumé

Les espèces de Leucocytozoon sont courantes dans les pays à climat chaud, mais sont souvent négligées comme parasites sanguins chez les volailles. Bien que Leucocytozoon macleani soit moins virulent que Leucocytozoon caulleryi, il peut néanmoins avoir un impact négatif sur les performances de production. En Thaïlande, les rapports disponibles indiquent une prévalence élevée de Leucocytozoon spp., mais les caractéristiques morphologiques détaillées des parasites restent insuffisamment connues. Dans cette étude, des frottis sanguins colorés au Giemsa et de l’ADN génomique (g) extrait ont été obtenus chez 60 poulets domestiques (Gallus gallus domesticus). Les frottis sanguins ont été examinés pour détecter la présence d’espèces de Leucocytozoon et leurs caractéristiques morphologiques ont été étudiées. Soixante échantillons d’ADNg ont été utilisés pour l’amplification par PCR nichée du gène du cytochrome b des espèces de Leucocytozoon, suivie d’un séquençage et d’une analyse phylogénétique. Les examens microscopiques et moléculaires ont révélé respectivement une prévalence de leucocytozoonose chez les poulets de 85% et 90%. L’analyse des séquences a indiqué que plusieurs poulets infectés hébergeaient plusieurs lignées de Leucocytozoon. Leucocytozoon macleani a été identifié morphologiquement dans neuf échantillons et pourrait être lié aux lignées GALLUS17, GALLUS34 et aux nouvelles lignées GALLUS63. Les gamétocytes de L. macleani trouvés ressemblaient morphologiquement à ceux rapportés précédemment, mais présentaient certaines caractéristiques distinctes. Phylogénétiquement, les lignées de L. macleani isolées dans cette étude se sont regroupées séparément de certaines autres lignées de L. macleani déposées dans GenBank. En conclusion, la prévalence de l’infection à Leucocytozoon chez les poulets du nord-est de la Thaïlande était élevée, avec de fréquentes co-infections par plusieurs lignées. Leucocytozoon macleani pourrait présenter une spécification cryptique. Cette étude est le premier rapport sur les lignées de L. macleani décrites à l’aide de la nomenclature de la base de données MalAvi, ainsi que sur leurs caractéristiques morphologiques.