Short Note

Expression of EhRAD54, EhRAD51, and EhBLM proteins during DNA repair by homologous recombination in Entamoeba histolytica

Expression des protéines EhRAD54, EhRAD51 et EhBLM pendant la réparation de l’ADN par recombinaison homologue chez Entamoeba histolytica

¹ Programa Institucional de Biomedicina Molecular, Escuela Nacional de Medicina y Homeopatía del IPN, Guillermo Massieu Helguera No. 239, Fracc. La Escalera, Ticoman, México D.F., C.P. 07320, Mexico
² Posgrado en Ciencias Genómicas, Universidad Autónoma de la Ciudad de México, San Lorenzo No. 290, Col. del Valle, México D.F., C.P. 03110, Mexico
³ Programa de Doctorado en Biotecnología, Escuela Nacional de Medicina y Homeopatía del IPN, Guillermo Massieu Helguera No. 239, Fracc. La Escalera, Ticoman, México D.F., C.P. 07320, Mexico

^* Corresponding author: lmarchat@gmail.com

Received: 23 October 2013
Accepted: 7 February 2014

Abstract

Entamoeba histolytica, the protozoan responsible for human amoebiasis, exhibits a great genome plasticity that is probably related to homologous recombination events. It contains the RAD52 epistasis group genes, including Ehrad51 and Ehrad54, and the Ehblm gene, which are key homologous recombination factors in other organisms. Ehrad51 and Ehrad54 genes are differentially transcribed in trophozoites when DNA double-strand breaks are induced by ultraviolet-C irradiation. Moreover, the EhRAD51 recombinase is overexpressed at 30 min in the nucleus. Here, we extend our analysis of the homologous recombination mechanism in E. histolytica by studying EhRAD51, EhRAD54, and EhBLM expression in response to DNA damage. Bioinformatic analyses show that EhRAD54 has the molecular features of homologous proteins, indicating that it may have similar functions. Western blot assays evidence the differential expression of EhRAD51, EhRAD54, and EhBLM at different times after DNA damage, suggesting their potential roles in the different steps of homologous recombination in this protozoan.

Résumé

Le génome d’Entamoeba histolytica, le protozoaire parasite responsable de l’amibiase humaine, présente une grande plasticité qui est probablement associée à l’existence d’évènements de recombinaison homologue. Il possède les gènes du groupe d’épistasie RAD52, y compris les gènes Ehrad51 et Ehrad54, ainsi que le gène Ehblm, qui sont les principaux facteurs de recombinaison homologue chez d’autres organismes. Les gènes Ehrad51 et Ehrad54 sont transcrits différemment chez les trophozoïtes lorsque des cassures double-brin de l’ADN sont induites par le rayonnement ultraviolet C. En outre, il y a une surexpression de la recombinase EhRAD51 dans le noyau après 30 minutes. Dans cet article, nous continuons notre analyse du mécanisme de recombinaison homologue chez E. histolytica en étudiant l’expression des protéines EhRAD51, EhRAD54 et EhBLM en réponse au dommage de l’ADN. Les analyses bioinformatiques montrent que EhRAD54 possède les caractéristiques moléculaires des protéines homologues, ce qui indique qu’elle pourrait avoir les mêmes fonctions. Les essais de Western blot montrent que les protéines EhRAD54, EhRAD51 et EhBLM s’expriment de façon différentielle à différents moments après le dommage de l’ADN, ce qui suggère leur rôle potentiel dans les différentes étapes de la recombinaison homologue chez ce protozoaire.