Research Article

Activity of benzimidazoles against Dientamoeba fragilis (Trichomonadida, Monocercomonadidae) in vitro and correlation of beta-tubulin sequences as an indicator of resistance

Activité des benzimidazoles contre Dientamoeba fragilis (Trichomonadida, Monocercomonadidae) in vitro et corrélation des séquences de béta-tubuline comme indicateur de résistance

¹ Division of Microbiology, SydPath, St. Vincent’s Hospital, Darlinghurst, NSW 2010, Australia
² University of Technology Sydney, School of Medical and Molecular Biosciences, Broadway 2007, Australia
³ University of Technology Sydney, iThree Institute, Broadway 2007, Australia

^* Corresponding author: dstark@stvincents.com.au

Received: 16 March 2014
Accepted: 7 August 2014

Abstract

Recently, Dientamoeba fragilis has emerged as a significant and common enteropathogen. The majority of patients with dientamoebiasis present with gastrointestinal complaints and chronic symptoms are common. Numerous studies have successfully demonstrated parasite clearance, coupled with complete resolution of clinical symptoms following treatment with various antiparasitic compounds. Despite this, there is very little in vitro susceptibility data available for the organism. Benzimidazoles are a class of antiparasitic drugs that are commonly used for the treatment of protozoan and helminthic infections. Susceptibility testing was undertaken on four D. fragilis clinical isolates against the following benzimidazoles: albendazole, flubendazole, mebendazole, nocodazole, triclabendazole and thiabendazole. The activities of the antiprotozoal compounds at concentrations ranging from 2 μg/mL to 500 μg/mL were determined via cell counts of D. fragilis grown in xenic culture. All tested drugs showed no efficacy. The beta-tubulin transcript was sequenced from two of the D. fragilis isolates and amino acid sequences predicted a susceptibility to benzimidazoles. This is the first study to report susceptibility profiles for benzimidazoles against D. fragilis, all of which were not active against the organism. This study also found that beta-tubulin sequences cannot be used as a reliable marker for resistance of benzimidazoles in D. fragilis.

Résumé

Récemment, D. fragilis a émergé comme un entéropathogène important et commun. La majorité des patients avec dientamoebiase présente des troubles gastro-intestinaux et les symptômes chroniques sont fréquents. De nombreuses études ont démontré avec succès l’élimination des parasites, couplée à la résolution complète des symptômes cliniques, après traitement avec divers composés antiparasitaires. Malgré cela, il y a très peu de données disponibles sur la sensibilité in vitro de cet organisme. Les benzimidazoles sont une classe de médicaments antiparasitaires qui sont couramment utilisés pour le traitement des infections à protozoaires et helminthes. Les tests de sensibilité ont été réalisés sur quatre isolats cliniques de D. fragilis avec les benzimidazoles suivants : albendazole, flubendazole, mébendazole, nocodazole, triclabendazole et thiabendazole. Les activités des composés antiprotozoaires, à des concentrations allant de 2 μg/ml à 500 μg/ml ont été déterminées par comptage de cellules de D. fragilis cultivées en culture xénique. Tous les médicaments testés n’ont montré aucune efficacité. Le transcript de béta-tubuline a été séquencé à partir de deux isolats de D. fragilis, et les séquences d’acides aminés prédisaient une sensibilité aux benzimidazoles. Cette étude est la première à signaler des profils de sensibilité pour les benzimidazoles contre D. fragilis, qui tous étaient non actifs contre l’organisme. Cette étude a également révélé que les séquences de béta-tubuline ne peuvent pas être utilisées comme un marqueur fiable de la résistance de benzimidazoles chez D. fragilis.