Research Article

Expression and immunolocalisation of TpFABP as a candidate antigen for the serodiagnosis of rabbit Taenia pisiformis cysticercosis

Expression et immunolocalisation de TpFABP comme antigène candidat pour le sérodiagnostic de la cysticercose du lapin à Taenia pisiformis

¹ Department of Parasitology, College of Veterinary Medicine, Sichuan Agricultural University, Ya’an 625014, China
² College of Veterinary Medicine, Sichuan Agricultural University, Ya’an 625014, China
³ College of Life and Basic Science, Sichuan Agricultural University, Ya’an 625014, China

^* Corresponding author: guangyouyang@hotmail.com

Received: 16 June 2013
Accepted: 28 November 2013

Abstract

The larval stage of Taenia pisiformis, also known as Cysticercus pisiformis, is the causative agent of cysticercosis and the cause of severe health problems in rabbits that negatively impacts on husbandry production. To date, there is no fast detection method to identify early infections in rabbits. In the present study, a new dot-ELISA-based on an endogenous antigen fatty acid-binding protein (FABP) was developed for the detection of cysticercosis, and its potential was then evaluated using test serum samples. Immunolocalisation showed that T. pisiformis FABP (TpFABP) localised to the parenchyma of the bladder wall of the cysticercus and perinuclear cytoplasm of parenchyma of the adult parasite. After cloning and expression, recombinant TpFABP (rTpFABP) protein was used for serodiagnosis of T. pisiformis infection in rabbits by dot-ELISA. The antibody was detected 14 days post-infection in rabbits experimentally infected with T. pisiformis. Based on the necropsy results, the sensitivity and specificity of 169 serum samples tested by rTpFABP dot-ELISA were found to be 98.2% (54/55) and 92.1% (105/114), respectively. These data suggest that the dot-ELISA developed in this study has potential for detection of T. pisiformis infection in rabbits.

Résumé

Le stade larvaire de Taenia pisiformis, également connu sous le nom Cysticercus pisiformis, est l’agent causal de la cysticercose et la cause de graves problèmes de santé chez les lapins, ayant un impact négatif sur la production d’élevage. À ce jour, il n’existe aucune méthode de détection rapide pour identifier les infections précoces chez les lapins. Dans cette étude, un nouveau dot-ELISA basé sur une protéine de liaison aux acides gras antigéniques endogènes (FABP) a été développé pour la détection de la cysticercose, et son potentiel a ensuite été évalué en utilisant des échantillons de sérum. L’immunolocalisation a montré que la protéine FABP de T. pisiformis (TpFABP) se localisait au niveau du parenchyme de la paroi du cysticerque et du cytoplasme périnucléaire du parenchyme du parasite adulte. Après clonage et expression, la protéine recombinante TpFABP (rTpFABP) a été utilisée chez les lapins pour le diagnostic sérologique par dot-ELISA de l’infection à T. pisiformis. L’anticorps a été détecté 14 jours après l’infection chez des lapins infectés expérimentalement avec T. pisiformis. Sur la base des résultats d’autopsie, la sensibilité et la spécificité de 169 échantillons de sérum testés par rTpFABP dot-ELISA ont été respectivement de 98 % (54/55) et 92 % (105/114). Ces données suggèrent que le dot-ELISA développé dans cette étude a un potentiel pour la détection de l’infection à T. pisiformis chez les lapins.