Mémoire

Study of the stress proteins secreted by Leishmania donovani after treatment with edelfosine, mitelfosine and ilmofosine, and morphological alterations analyzed by electronic microscopy

Étude des protéines de stress secrétées par Leishmania donovani après traitement par edelfosine, miltefosine et ilmofosine, et analyse des altérations morphologiques par microscopie électronique

¹ Département de Parasitologie et Mycologie médicale, Université Claude Bernard - Lyon I, 8, av. Rockefeller, 69373 Lyon Cedex 08, France
² Institute of Biotechnology, Department of Parasitology, Faculty of Sciences, Campus Fuentenueva, CP 18071, Granada, Spain

^* Correspondence: Samira Azzouz. Tel.: + 33 (0) 4 78 77 72 77 – Fax: + 33 (0) 4 78 77 71 58. E-mail: sazzouz@ugr.es

Received: 14 January 2009
Accepted: 18 May 2009

Abstract

We studied the stress proteins induced in protozoa Leishmania donovani after treatment with edelfosine, miltefosine and ilmofosine. We studied the morphological and structural modifications caused in the promastigote forms of the parasite after treatment with the three alkyl-lysophospholipids (ALPs). A resistant strain of L. donovani to miltefosine was obtained and the morphological modifications were observed. The stress proteins induction was studied in promastigote forms and also in amastigote-like forms obtained in vitro. The proteins synthesized with the three alkyl-lysophospholipids were compared to those obtained by heat shock. The axenic amastigote forms synthesized a pattern of different proteins for those observed in the promastigote forms. The morphological alterations were observed under electronic microscopy. The membrane and mitochondria were the organs most affected by the three ALPs. We noted an apparition of vacuoles and vesicles in the treated promastigotes. In the resistant strain, we noted myelin bodies in the treated and untreated parasites.

Résumé

Le protozoaire Leishmania donovani, quand il est traité avec l’edelfosine, la miltefosine et l’ilmofosine, synthétise de nouvelles protéines appelées “protéines de stress”. Ces protéines ont fait l’objet de ce travail, en plus de l’étude des modifications morphologiques et structurelles provoquées chez le parasite traité avec ces trois alkyl-lysophospholipides (ALPs). Une souche de L. donovani résistante à la miltefosine a été créée et les modifications causées après traitement avec cette molécule ont été comparées à celles de la souche résistante non traitée. Les protéines de stress ont été étudiées chez les formes promastigotes mais aussi chez les formes amastigotes axéniques obtenues in vitro. Ces dernières synthétisent des protéines différentes à celles synthétisées par les formes promastigotes. Les protéines synthétisées après traitement avec les ALPs sont comparées à celles synthétisées par “heat shok”. Les altérations morphologiques ont été observées par microscopie électronique. La membrane et la mitochondrie sont les organes les plus affectés par les trois produits. On note l’apparition de vésicules et de vacuoles chez les promastigotes traités. Chez la souche résistante, on note la présence de corps myéliniques chez les parasites traités comme chez les parasites non traités.