Note de recherche

Establishment of a continuous culture system for Entamoeba muris and analysis of the small subunit rRNA gene

Établissement d’un systeme de culture successive pour Entamoeba muris et analyse du gène codant pour la petite sousunité de l’ARNr

¹ Department of Tropical Medicine and Parasitology, School of Medicine, Keio University, Tokyo, Japan
² Division of Clinical Microbiology, Department of Microbiology, Tokyo Metropolitan Institute of Public Health, Tokyo, Japan

^* Correspondence: Seiki Kobayashi, Ph.D., Department of Tropical Medicine and Parasitology, School of Medicine, Keio University, Shinjukuku, Tokyo 160-8582, Japan. Tel: +81 3 5363 3761 – Fax: +81 3 3353 5958. E-mail: skobaya@sc.itc.keio.ac.jp

Received: 12 November 2008
Accepted: 3 February 2009

Abstract

We established a culture system for Entamoeba muris (MG-EM-01 strain isolated from a Mongolian gerbil) using a modified Balamuth’s egg yolk infusion medium supplemented with 4% adult bovine serum and Bacteroides fragilis cocultured with Escherichia coli. Further, encystation was observed in the culture medium. The morphological characteristics of E. muris are similar to those of Entamoeba coli (E. coli); moreover, the malic isoenzyme electrophoretic band, which shows species-specific electrophoretic mobility, of E. muris had almost the same mobility as that observed with the malic isoenzyme electrophorectic band of E. coli (UZG-EC-01 strain isolated from a gorilla). We determined the small subunit rRNA (SSU-rRNA) gene sequence of the MG-EM-01 strain, and this sequence was observed to show 82.7% homology with that of the UZG-EC-01 strain. Further, the resultant phylogenetic tree for molecular taxonomy based on the SSU-rRNA genes of the 21 strains of the intestinal parasitic amoeba species indicated that the MG-EM-01 strain was most closely related to E. coli.

Résumé

Un système de culture d’Entamoeba muris (souche MG-EM-01, isolée da la gerbille de Mongolie) a été établi en utilisant un milieu d’infusion de vitellus de Balamuth modifié, supplémenté avec 4 % de sérum bovin adulte et de Bacteroides fragilis en coculture avec Eschericia coli. L’enkystement s’est également présenté dans le milieu de culture. Les aspects morphologiques d’E. muris sont semblables à ceux d’Entamoeba coli et la bande isoenzymatique malique présentant une mobilité électrophorétique spécifique à l’espèce avait à peu près la mobilité d’Entamoeba coli (souche UZG-EC-01, isolée d’un gorille). La séquence du gène codant pour la petite sous-unité de l’ARNr (SSU-rRNA) de la souche MG-EM-01 a été déterminée et l’homologie de la séquence était également identique à 82,7 % de celle de la souche UZG-EC-01. L’arbre phylogénétique qui en résulte pour la taxonomie moléculaire basée sur les gènes SSU-rRNA de 21 souches d’espèces de parasites intestinaux amibiens indiquait également que la souche MG-EM-01 était étroitement liée à E. coli.