Mémoire

Isolation of Leishmania (Viannia) braziliensis from Lutzomyia spinicrassa (species group Verrucarum) Morales Osorno Mesa, Osorno & Hoyos 1969, in the Venezuelan Andean Region

Isolement de Leishmania (Viannia) braziliensis chez Lutzomyia spinicrassa (groupe Verrucarum) Morales Osorno Mesa, Osorno & Hoyos 1969, dans la région Andine du Venezuela

¹ Universidad Experimental del Táchira (UNET), Centro de Estudiosde Vectores de Enfermedades (CEVE), San Cristóbal, Venezuela
² Instituto de Biomedicina, UCV, Caracas, Venezuela
³ Universidad de Carabobo, CNRFV, Núcleo Aragua, Maracay, Venezuela

^* Correspondence: M. Dora Feliciangeli. Fax: ++58 243 242 5333 – E-mail: mdora@telcel.net.ve

Received: 22 June 2005
Accepted: 15 November 2005

Abstract

Natural infection with Leishmania spp. in phlebotomine sandflies was searched for during a longitudinal study carried out from July 1997 to July 1998 in the village Catarnica, Municipality Independencia, Táchira State. This hamlet is an old endemic focus of cutaneous leishmaniasis in the Venezuelan Andean region, which lies close to the Colombian border at 1,300 m a.s.l., in an agricultural area mainly used for cultivating coffee. Phlebotomine sandflies were collected using Shannon traps placed in the peridomestic habitat from 19:00 to 21:00 hs. Males were stored in alcohol 70% while females were kept in Nunc vials with 10% DMSO and cryopreserved in liquid nitrogen for subsequent dissection and identification. The most abundant anthropophilic species was Lutzomyia spinicrassa with 3,032 males and 4,290 females (85.4%). Among 1,633 (38%) females of Lu. spinicrassa dissected, 26 (1.6%) were infected with promastigotes, while no natural infection was found in 209 females of other species. The flagellates were identified as Leishmania braziliensis braziliensis using PCR with species specific primers derived from nuclear DNA and hybridization using species specific probe labelled with digoxigenin. This parasite had been previously isolated from patients with cutaneous leishmaniasis from the same area. These results show Lu. spinicrassa as a new proven vector of Leishmania braziliensis in the Andean region of Venezuela.

Résumé

L’infestation naturelle des phlébotomes par Leishmania spp. a été l’objet d’une étude longitudinale menée de juillet 1997 à juillet 1998 dans le village de Catarnica, municipalité d’Independencia, État de Táchira. Ce hameau est connu de longue date pour être un foyer de leishmaniose cutanée dans cette région andine du Venezuela à la frontière avec la Colombie, à une altitude moyenne de 1300 m, et où l’on cultive principalement le café. Les phlébotomes ont été capturés avec des pièges de Shannon placés en zone péridomestique de 19 à 21 heures. Les mâles ont été conservés dans de l’alcool à 70%, tandis que les femelles ont été placées dans des ampoules de Nunc avec 10% de DMSO et conservées dans de l’azote liquide pour les dissections et identifications ultérieures. L’espèce anthropophile la plus souvent capturée a été Lutzomyia spinicrassa : 3032 mâles; 4290 femelles (85,4%). Sur les 1633 femelles (38%) de Lu. spinicrassa disséquées, 26 (1,6%) étaient porteuses de promastigotes, tandis qu’aucune infestation naturelle n’était observée chez les 209 femelles d’autres espèces. Par PCR, ces flagellés ont été identifiés comme étant Leishmania braziliensis braziliensis. Ce parasite avait été isolé précédemment chez des personnes atteintes de leishmaniose cutanée dans la même région. Les résultats prouvent que Lu. spinicrassa est un nouveau vecteur de Leishmania braziliensis dans la région andine du Venezuela.