Note de recherche

Immunolocalization of an enterotoxic glycoprotein exoantigen on the secretory organelles of Cryptosporidium parvum sporozoites

Immunolocalisation d'un exoantigène glycoprotéique entérotoxique dans les organites sécrétoires de sporozoïtes de Cryptosporium parvum

¹ Microbiology and Parasitology Department, Faculty of Medicine. Suez Canal University, Ismailia, Egypt.
² Electron Microscopy Center, Faculty of Science, Zagazig University, Egypt.

^* Correspondence : Dr Khalid A. El-Shewy, Microbiology Department, College of Medicine and Medical Sciences, King Khalid University, PO Box 641, Abha, Kingdom of Saudi Arabia. Fax :00966 72247570 E-mail : Khel666@hotmail.com

Received: 1 April 2003
Accepted: 9 December 2003

Abstract

In this study, the fine ultrastructures of the secretory organelles of C. parvum sporozoites were demonstrated using transmission electron microscopy (TEM). Meanwhile, a previously identified enterotoxic 18-20 kDa copro-antigen (18-20 kDa CCA), associated with cryptosporidiosis in both human and calves, was isolated and immunolocalized on C. parvum sporozoites. Using immunoelectron microscopy and anti-18-20 kDa monospecific antibody demonstrated marked existence of the 18-20 kDa CCA on the apical organelles and at the trilaminar pellicles. An anterior extrusion of this protein was demonstrated around the excysted and released sporozoites. However, non excysted sporozoites did not show this protein. Affinity blotting, with biotinylated jacalin, demonstrated the O-linked oligosaccharide moiety of this protein. The potential role of this protein in the host cell invasion and/or gliding motility remains unelucidated. However, its enterotoxicity, location and secretory nature suggest that it may be a target for neutralization or invasion inhibition of Cryptosporidium.

Résumé

Dans cette étude, l'ultrastructure fine des organites sécrétoires de sporozoites de C. Parvum a été étudiée en microscopie électronique à transmission (TEM), alors qu'un coproantigène entérotoxique de sporozoïte (18 kDa CCA), préalablement identifié et associé avec la cryptosporidiose de l'homme ou des bovins, était localisé à l'aide d'anticorps. L'anticorps monospécifique anti-antigène (18-20 kDa) révèle la présence de l'antigène dans les organites apicaux et dans la pellicule trilaminaire. Une extrusion antérieure de celte protéine est repérable autour du sporozoïte relaché par dékystement, alors qu'elle n'existe pas autour des sporozoites non dékystés. Le transfert d'affinité réalisé avec de la jacaline biotinylée a révélé une partie oligosaccharidique O liée sur cette protéine. Le rôle potentiel de cette protéine dans l'invasion de la cellule et dans le glissement du sporozoïte n'a pas été tiré au clair. Cependant, son entérotoxicité, sa localisation et sa nature sécrétoire suggèrent qu'elle pourrait être la cible d'une neutralisation ou d'une inhibition de l'invasion de Cryptosporidium.