Mémoire

K24 T. gondii isolate is a hybrid and has the virulence of lineage I isolates

La souche K24 de T. gondii est un hybride présentant la virulence des souches de la lignée I

Department of Biology and Wildlife Diseases, University of Veterinary and Pharmaceutical Sciences, Brno, Czech Republic.

^* Correspondence : Dr Eva Bártová, Department of Biology and Wildlife Diseases, University of Veterinary and Pharmaceutical Sciences, Palackého 1-3, 612 42 Brno, Czech Republic. Tel. : +420 54156 2633 - Fax : +420 54924 3020 E-mail : bartovae@vfu.cz

Received: 2 October 2003
Accepted: 15 February 2004

Abstract

A permanently high virulence was found in tachyzoites of T. gondii K24 after serial passage in mice (90 passages during 324 days). Virulence tests revealed that a single tachyzoite of the 50^th passage represented LD₁₀₀ for mice. Analysis of genotype of K24 isolate was done by PCR/RFLP with ROP1/DdeI, SAG1/DdeI, 850/RsaI and IGS/RsaI and by RFLP/DNA with TGR 1E sequence and PstI enzyme. K24 isolate had an atypical genotype, with an association of type II (for ROP1, SAG1 genes and TGR1 E sequence) and type I (for 850 gene) alleles, and a new pattern observed for IGS. All tested PCR/RFLP did not change through 2, 10, 20, 28, 40, 50, 60, 70, 81 and 90 tested passages. In RFLP/DNA with PstI enzyme and TGR1 E probe, K24 isolate produced a pattern with seven fragments of the size ranging from one to 23 kb and did not change through 7, 56, 70 and 83 tested passages. K24 T. gondii isolate is a hybrid and has the virulence of lineage I isolates.

Résumé

Après passages successifs sur souris (90 passages en 324 jours), nous avons pu observer une augmentation de la virulence des tachyzoites de T. gondii. Les tests de virulence ont en effet montré qu'un seul tachyzoite prélevé au 50^ème passage induit une DL₁₀₀ chez la souris. L'analyse du génotype de la souche K24, effectuée par (i) PCR/RPLF sur ROP1/Ddel, ROPl/Ddel, SAGl/DdeI, 850/RsaI et IGSAsal, (ii) RFLP/DNA sur TGR1E, et (iii) l'enzyme PstI, a révélé l'existence d'une structure atypique, associant les allèles du type II (pour les gènes ROP1, SAG1 et la séquence TGR 1E) et du type I (gène 850). Par contre, une nouvelle combinaison spécifique a été mise en évidence pour IGS. Les analyses génotypiques par PCR/RFLP effectuées au cours des passages (2, 10, 20, 28, 40, 50, 60, 70, 81 et 90), n'ont révélé aucune différence. L'analyse RFLP (Pstl et TGR 1 E) de K24 a montré l'existence d'un patron de sept fragments de restriction (1 à 23 kb) qui ne varie pas au cours des 7, 56, 70 et 83^ème passages. La souche K24 de T. gondii est donc un hybride présentant la virulence des souches de la lignée I.