Mémoire

In vitro propagation of two Perkinsus species from the softshell clam Mya arenaria

Propagation in vitro de deux espèces de Perkinsus de la palourde à coquille lisse, Mya arenaria

¹ National Marine Fisheries Service (NMFS), Cooperative Oxford Laboratory, 904 S. Morris St., Oxford, MD 21654-9724
² Virginia Institute of Marine Science, School of Marine Science, The College of William and Mary, Gloucester Point, VA 23062-1346.

^* Correspondance : Shawn McLaughlin. Disclaimer: Reference to tradenames does not imply endorsement by NMFS. Tel.: 410/226-5193 - Fax: 410/226-5925

Received: 28 March 1998
Accepted: 25 July 1998

Abstract

Two continuous, axenic cultures of Perkinsus spp. (H49 and G117) were obtained from the softshell clam Mya arenaria collected from Swan Point in the Chester River, Chesapeake Bay (Maryland).

Isolate H49 was obtained from the hemolymph of a heavily infected clam. Except for their larger size, H49 trophozoites and schizonts exhibited the characteristic morphology of Perkinsus marinus and divided by schizogony. Isolate G117 was obtained from a combined gill/palp sample of a moderately infected clam. Unlike H49, vegetative forms (trophozoites and schizonts) of G117 were present along with prezoosporulation stages in the same culture. In culture, G117 cells multiplied by both schizogony and successive bi-partition.

Both H49 and G117 cells reacted positively with anti-Perkinsus marinus polyclonal serum and formed hypnospores upon incubation in Ray's fluid thioglycolate medium that stained black with Lugol's iodine. This is the first isolation of Perkinsus species from the softshell clam. Studies to determine the infectivily, pathogenicity, enzyme activities, and genolyping of both softshell clam Perkinsus spp. are ongoing.

Résumé

Deux cultures axéniques permanentes de Perkinsus spp. (H49 et G117) ont été obtenues de la palourde à coquille lisse Mya arenaria, récoltée à Swan Point dans le fleuve Chester, dans la baie de Chesapeake (Maryland).

L'isolai H49 a été obtenu de l'hémolymphe d'une palourde hautement infestée. Mise à part leur grande taille, les trophzoïtes et les schizontes H49 présentent la morphologie caractéristique de Perkinsus marinus et se divisent par schizogonie. L'isolai G117 a été obtenu à partir d'un échantillon combiné de lamelles et de palpes d'une palourde modérément infestée. Contrairement à H49, les formes végétatives (trophozoïtes et schizontes) de G117 co-existent avec des stades de pré-zoosporulation dans la même culture. En culture, les cellules G117 se multiplient par schizogonie ainsi que par des divisions en deux successives.

H49 et G117 ont réagi positivement avec un serum polyclonal anti-Perkinsus marinus et ont formé des hypnospores lors de l'incubation dans le milieu fluide au thioglycolate de Ray, qui se sont colorées en noir sous Lugol. Il s'agit du premier isolement d'une espèce de Perkinsus à partir de palourde à coquille lisse. Les études se poursuivent pour déterminer l'infectivité, la pathogénicité, l'activité enzymatique et le génotypage des deux espèces de Perkinsus obtenues de la palourde à coquille lisse.