Mémoire

IFNγ and IL-10 production by hepatic lymph node and peripheral blood lymphocytes in Fasciola hepatica infected sheep

Production d’IFNγ et d’IL-10 par les lymphocytes des noeuds lymphatiques hépatiques et du sang périphérique de moutons infestés par Fasciola hepatica

¹ Unité associée INRA/ENVN Interactions Hôte-Parasite-Milieu, École Nationale Vétérinaire de Nantes, BP 40706, F-44307. Nantes. Cedex 03.
² Unité Immunopathologie des maladies parasitaires, INRA, F-37380, Nouzilly.

^* Correspondance : Emmanuelle Moreau. Tel.: 02 40 68 77 05 - Fax: 02 40 68 76 94 E-mail: moreau@vet-nantes.fr

Received: 23 June 1998
Accepted: 16 September 1998

Abstract

The present study was designed to determine whether IFNγ and IL- 10 were secreted by peripheral blood mononuclear cells (PBMC) and hepatic lymph node mononuclear cells (HLNMC) from 17 Fasciola hepatica infected sheep after in vitro stimulation by Fasciola hepatica excretory-secretory products (FhESP) during the first six weeks of two different infections. The IFNγ concentration in mononuclear cells (MC) culture supernatants was determined by sandwich ELISA. The presence of IL-10 in MC culture supernatants was determined by the capacity of these to inhibit, with or without monoclonal antibodies to IL-10, the NO production of recombinant bovine IFNγ (rBolFNγ) activated monocytes. FhESP- stimulated PBMC and HLNMC produced IFNγ in culture supernatants from DPI 7 (day post-infestation 7) to DPI 14. Culture supernatants of PBMC stimulated with FhESP first induced an increase in the NO production of rBolFNγ activated monocytes. After 2 or 3 weeks of infection, MC culture supernatant reduced the NO production of rBolFNγ activated monocytes. From DPI 35, anti-IL-10 antibodies addition restored or enhanced NO production. During sheep fasciolosis, IFNγ production increased only until the first two weeks post infection. IL-10 could be secreted throughout the first six weeks of infection and could inhibit monocytes from DPI 35.

Résumé

Cette étude a été réalisée afin de déterminer si les cellules mononucléées du sang périphérique (CMSP) et des nœuds lymphatiques hépatiques (CMNLH) de 17 moutons infestés par Fasciola hepatica, stimulées avec des produits d'excretion-sécrétion de F. hepatica (PESFh), sécrétent de l'IFNγ et de l'IL-10, et ce durant les six premières semaines de deux infestations, La concentration d’IFNγ dans les surnageants de culture des cellules mononuclées (CM) a été mesurée par une technique d’ELISA sandwich. La présence d'IL-10 dans les surnageants de culture des CM a été déterminée par leur capacité à inhiber, avec ou sans anticorps monoclonaux anti-IL-10, la production de NO par des monocytes activés avec de l'IFNγ recombinant de bovin (IFNγrBo). Les CMSP et les CMNLH stimulées par les PESFh produisent de l’IFNγ entre le 7^e et le 14^e jour après infestation (entre JPI 7 et JPI 14). Les surnageants de culture des CMSP activées avec des PESFh induisent dans un premier temps une augmentation de la production de NO par les monocytes activées par l'IFNγrBo. Après deux à trois semaines post infestation, les surnageants de culture des CM entrainent une réduction de la production de NO. Après JPI 35, l’addition d’anticorps anti-IL-10 entraîne une restauration ou une augmentation de la production de NO. Durant la fasciolose chez le Mouton, la production d'IFNγ augmente uniquement durant les deux premières semaines d'infestation. L'IL-10 pourrait être sécrétée tout au long des six premières semaines d'infestation et pourrait inhiber les monocytes après la 5^e semaine.