Mémoire

Development and characterization of paromomycin-resistant Leishmania donovani promastigotes

Développement et caractérisation de promastigotes de Leishmania donovani résistant à la paromomycine

¹ University of damascus, Faculty of Pharmacy, Dept of Biochemistry & Microbiology, Damascus, Syria.
² Institut de Chimie des Substances Naturelles, CNRS, Av. de la Terrasse, 91198 Gif-sur-Yvette Cedex, France.
³ Laboratoire Populations, Génétique et Évolution, CNRS, Av. de la Terrasse, 91198 Gif-sur-Yvette Cedex, France.

^* Correspondence : M. Robert-Gero. Tel: 00 33 1 69 82 30 77 - Fax : 00 33 1 69 07 72 47 - E-mail : malka.gero@icsn.cnrs-gif.fr

Received: 9 September 1997
Accepted: 5 February 1998

Abstract

Paromomycin is an antileishmanial chemotherapeutic agent. Leishmania donovani promastigotes resistant to 800 μM of paromomycin were selected by increasing drug pressure and cloned. These promastigotes did not acquire multidrug resistance. Paromomycin resistance was stable in the absence of the drug in the culture. It remained stable also in amastigotes isolated after a passage in mice. Furthermore the resistant parasites were still infective to macrophages in vitro and for mice in vivo. A sensitive method to detect and to quantify intracellular paromomycin by HPLC was developed and allowed to show that the main mechanism of resistance seems to be due to decreased drug uptake probably as a consequence of altered membrane composition.

Résumé

La paromomycine est un médicament ayant aussi une activité antileishmanienne. Des promastigotes de Leishmania donovani résistants à 800 μM de paromomycine ont été obtenus par pression médicamenteuse et clonage. Ces promastigotes n'ont pas acquis de polychimiorésistance. La résistance à la paromomycine était stable en l'absence de cette molécule dans le milieu de culture. Elle est restée stable également dans les amastigotes isolés après passage chez la souris. De plus, les parasites résistants sont restés infectieux pour les macrophages in vitro et pour la souris. Une méthode sensible pour détecter et quantifier la paromomycine intracellulaire par HPLC a été développée et a permis de montrer que le principal mécanisme de résistance semble être dû à une diminution de l'absorption de la paromomycine comme une conséquence de l'altération de la composition membranaire.