Note de recherche

Detection of toxoplasma gondii parasitemia by polymerase chain reaction in perorally infected mice

Détection de Toxopiasma gondii par “polymerase chain reaction” (PCR) dans le sang de souris infectées per os

¹ Laboratoire de Parasitologie-Mycologie, Hôpital Cochin, 27 rue du Faubourg Saint-Jacques, 75679 Paris cédex 14, France.
² Laboratoire de Parasitologie-Mycologie. Hôpital Saint-Louis. 1 avenue Claude Vellefaux, 75475 Paris cédex 10, France.
³ Laboratoire de Biochimie, Hôpital Louis Mourier, 178 rue des Renouillers, 92700 Colombes, France.

^* Corresponding author : Dr A. Paugam, Hôpital Cochin, 27 rue du Faubourg Saint-Jacques, 75679 Paris cédex 14, France. Tel. : (33) 42 34 14 97 - Fax : (33) 42 34 14 96

Accepted: 16 February 1995

Abstract

Sequential blood samples collected from mice infected perorally with an avirulent strain of T. gondii were analysed for parasite DNA by a polymerase chain reaction method (PCR). Two pairs of primers specific for gene B1 and the repetitive DNA sequence TGR1E were used for DNA amplification. Amplified products were detected by means of electrophoresis with ethidium bromide staining. Parasitemia was also determined by cell culture.

Parasitemia was never detected by the tissue culture method, whereas parasite DNA was continously detected with PCR from day 2 to day 21. These results confirm the high sensitivity of PCR for T. gondii DNA in blood, and show that circulating DNA is present for long periods in mice following primary infection.

Résumé

Des prélèvements sanguins de souris infectées per os par une souche chronique de T. gondii ont été séquentiellement analysés par PCR pour la détection d'ADN toxoplasmique. Deux couples d'amorces, l'un spécifique du gène B1, l'autre de la séquence répétée TGR1_E ont été utilisés pour l'amplification génomique. Les produits d'amplification ont été révélés par électrophorèse sur gel coloré au bromure d'éthidium. Parallèlement la parasitémie était recherchée par culture cellulaire. Dans aucun des cas une parasitémie n'a pu être mise en évidence par culture alors que la PCR a permis de mettre en évidence du DNA toxoplasmique du 2^e jour au 21^e jour qui ont suivi l'infection. Ces résultats confirment la grande sensibilité de la PCR pour détecter la circulation sanguine d'ADN toxoplasmique et mettent en évidence le caractère prolongé de la durée de cette circulation chez la souris expérimentalement infectée.