Mémoire

Plasmodium berghei : the use of discontinuous urografin density gradients for the separation of exoerythrocytic malaria parasites

L’utilisation de gradients de densité discontinue à l’urografine pour la séparation des stades exoérythrocytaires de Plasmodium berghei

Laboratorium voor Protozoölogie, Instituut voor Tropische Geneeskunde, Nationalestraat 155, B-2000 Antwerpen, Belgium.

Accepted: 3 June 1993

Abstract

Urografin was used in the lower cushion of discontinuous density gradient systems, for the separation of human hepatoma cells (Hep G2) infected with exoerythrocytic P. berghei forms from uninfected cells. The hepatoma cells exhibited a rather heterogeneous density distribution, masking the possible density differences between infected and uninfected cells and hindering the efficient separation of both cell types. Purely osmotic damage caused by Urografin on human erythrocytes and hepatoma cells is very limited. On the other hand, the direct toxic effects on P. falciparum blood stages and on P. berghei exoerythrocytic stages are very pronounced. The growth of the former forms is partially inhibited after a pretreatment, but remains acceptable if the contact with Urografin is relatively short. It is almost completely blocked during permanent incubation. The latter forms are killed after 1 hour of contact with Urografin.

Résumé

L’urografine a été utilisée dans la couche inférieure de gradients de densité discontinue, pour la séparation de cellules d’hépatome humain (Hep G2) infectées de formes exoérythrocytaires de P. berghei et de cellules non infectées. Des cellules dérivées d’hépatome humain ont suivi une distribution de densités relativement hétérogène, en masquant les différences en densité éventuelles entre des cellules infectées et non infectées, et en gênant donc la séparation efficace des deux types cellulaires. Les dégâts purement osmotiques causés par l’urografine sur les érythrocytes humains et sur les hépatomes sont très limités. D’un autre côté, les effets toxiques immédiats sur les formes érythrocytaires de P. falciparum et sur les formes exoérythrocytaires de P. berghei sont très prononcés. La croissance de ces premières formes est partiellement inhibée après le prétraitement, mais elle reste acceptable si le contact avec l’urografine est relativement court. Cette croissance est presque complètement inhibée pendant une incubation permanente. Les formes exoérythrocytaires de P. berghei sont tuées après 1 heure de contact avec l’urografine.