Mémoire

Étude in vitro de médicaments leishmanicides vectorisés

Study of action of loaded and unloaded drug carriers against leishmania in an in vitro model

¹ Laboratoire de Parasitologie, Faculté de Médecine, Paris XII, 6, rue du Général-Sarrail, F 94010 Créteil., France.
² Laboratoire de Parasitologie, Faculté de Pharmacie, Paris XI., France.
³ Service de Pharmacie et Toxicologie, Hôpital Henri Mondor, Créteil., France.
⁴ Laboratoire de Pharmacie galénique et Biopharmacie, Faculté de Pharmacie, Paris XI., France.

Accepté : 23 Décembre 1992

Résumé

L’activité des principes actifs habituellement utilisés au cours des leishmanioses a pu être améliorée, en les incorporant à un vecteur.

Nous présentons un modèle in vitro permettant l’étude des interactions leishmanies-nanoparticules chargées ou non chargées. Ce travail a été réalisé avec deux types de nanoparticules : des nanosphères de polyisoalkylcyanoacrylate, vecteur particulaire, biodégradable et des nanosphères de méthacrylate non chargées et chargées de pentamidine.

Le modèle associe la lignée mono-histiocytaire U397 et des formes amastigotes de Leishmania major. La méthodologie a consisté à mettre en contact, des concentrations de l’ordre de 5 à 50 µg/ml pour les polyisoalkylcyanoacrylates et de 50 à 200 µg/ml pour les polymères de méthacrylate vis-à-vis de 3.10⁵ cellules infectées/ml ; l’efficacité des nanoparticules est évaluée 24 h plus tard en microscopie optique par mesure de l’index de l’infestation résiduelle.

Nous présentons ici les résultats des essais aux concentrations pour lesquelles nous obtenons une altération ou une disparition des leishmanies dans les vacuoles d’endocytose.

La validité et l’intérêt de ces résultats sont discutés.

Abstract

Antileishmanial chemotherapy is hampered by the location of parasites within lysosomal vacuoles of the macrophages which restricts the bioavailability of many potential antileishmanial compounds. In this study, the effectiveness of pentamidine targeted to the infected cells by a linkage to a colloidal drug carrier, methacrylate polymere nanoparticles was explored. In the same way, polyisoalkylcyanoacrylate nanospheres which have, in vitro, trypanolytic properties were also tested. The study was performed in an in vitro model using Leishmania major amastigote stages within the U 937 human monohistiocytic cell line. The antileishmanial activities of unloaded or pentamidine-loaded nanoparticles were compared to those of the free drugs. The 50 % effective concentration of targeted pentamidine was 0.10 µg/ml, while it was up to 2.7 µg/ml with the free drug after a 24-hour incubation time. The pentamidine-bound nanoparticles proved to be 25 times more active than the free drug. Unloaded polyisoalkylcyanoacrylate nanoparticles destroyed intracellular amastigote stages (50 % EC =15 µg/ml) but at a level close to the cytotoxic concentration.