Mémoire

Fractionation of Mouse malarious blood according to parasite developmental stage, using a percoll-sorbitol gradient

Fractionnement, à l’aide d’un gradient de Percoll-sorbitol, de sang de Souris paludéenne, en fonction du stade parasitaire

¹ Department of Biological Chemistry, Institute of Life Sciences, The Hebrew University of Jerusalem, Jerusalem 91904, Israel.
² Muséum National d’Histoire Naturelle, Laboratoire des Vers, 61, rue Buffon, F 75321 Paris, France.
³ Département de Parasitologie, Groupe Hospitalier Pitié-Salpêtrière, 47-83, boulevard de l’Hôpital, F 75651 Paris Cedex 13, France.

Accepted: 11 March 1987

Abstract

Asexual intraerythrocytic malarial parasites permeabilize the membrane of their host cell to small monelectrolytes and anions. Since permeabilization increases with parasite maturation, this property has been used previously to fractionate blood infected with Plasmodium falciparum and P. knowlesi according to the developmental stage of the parasite, using Percollsorbitol density gradients. We have extended this method to fractionate mouse blood infected with four species of rodent malaria : P. chahaudi, P. vinckei, P. voelii and P. berghei. While the method works in principle in this case, the polyparasitism which characterizes these species prevented explicit separation according to developmental stage. Hence, erythrocytes harbouring several ring-stage parasites appeared in the same fraction which contained cells hosting a single trophozoite, and polyparasitized trophozoites were associated with singly-infected schizont. This observation implies that permeabilization of the host cell membrane results from the integrated metabolic activity of the parasite(s) and is not related to a specific phase of parasite development.

Résumé

Les stades érythrocytaires asexués des Plasmodium perméabilisent la membrane de leur cellule-hôte aux petites molécules non chargées et aux anions. Du fait de l’augmentation de cette perméabilisation au cours de la maturation du parasite, cette propriété a déjà été utilisée auparavant pour fractionner du sang infecté par Plasmodium falciparum et P. knowlesi, en utilisant un gradient de Percoll-sorbitol et ceci en fonction du stade de développement du parasite. Nous avons appliqué cette méthode au fractionnement de sang de Souris infectées par 4 espèèes de Plasmodium de Rongeurs : P. chabaudi, P. vinckei, P. yoelii et P. berghei. Bien que la méthode s’applique en principe dans ce cas, le polyparasitisme des globules rouges, qui caractérise ces espèces, empêche une séparation stricte des parasites en fonction de leur âge. Ainsi, des érythrocytes hébergeant plusieurs anneaux se retrouvent dans la même fraction que des cellules contenant un trophozoïte unique et des érythrocytes contenant plusieurs trophozoïtes sont associés à des globules contenant un seul schizonte. Ces observations impliquent que la perméabilisation de la membrane de la cellule-hôte résulte de l’activité métabolique globale du ou des parasites et est sans rapport avec une phase évolutive spécifique.