Mémoire

Etude de divers facteurs influençant le comportement des Trypanosomes à basse température

¹ Travail du C.H.U. Cochin — Maternité (Port-Royal) Service de Parasitologie,27, rue du Fbg-St-Jacques, F - 75 - Paris-14 e, France.
² Laboratoire de Parasitologie de la Faculté de Médecine de Paris, 15, rue de l’Ecole-de-Médecine, F - 75 - Paris-6 e, France.

Résumé

Alors que la conservation prolongée des Trypanosomes est irréalisable à — 25°, elle est très possible et même excellente aux basses températures (— 79° C = neige carbonique et — 196° C = azote liquide), à condition d’agir méthodiquement.

• 1°

  Emploi de protecteurs chimiques parmi lesquels le diméthylsulfoxyde (D.M.S.O.) s’avère légèrement supérieur à la glycérine et tous deux nettement plus efficaces que le glycoléthylène. Les taux de concentration à 10 % sont préférables à ceux de 5 % et tout particulièrement à — 196° C.

• 2°

  Avoir recours à une technique de congélation progressive ménageant des paliers et surtout lors de l’emploi de l’azote liquide.

Le comportement des Trypanosomes, qu’il s’agisse d’espèces ou seulement de souches d’une même espèce, est différent vis-à-vis de la congélation aux basses températures et bien qu’il soit possible de les conserver tous en respectant les précautions énoncées ci-dessus, les pourcentages de survie sont variables.

Dans l’ordre, T. equiperdum et T. brucei sont les plus résistants, puis viennent les Trypanosomes pathogènes pour l’homme : T. gambiense (souche Casamance, Féo, Yaoundé) et enfin T. cruzi qui est de loin le plus délicat.

Il est possible que cette fragilité puisse s’expliquer par une structure histo-chimique particulière et en particulier par la teneur en A.D.N. et la constitution des nucléotides.

Abstract

Congelation technics for conservation of Bacteria, Protozoa and even metazoa strains have been used since a long time ; but they are now more and more employed.

The results of our experiences show that if a continued preservation of Trypanosomes is not possible at — 25° C, it appears to be very easy at low temperatures as — 79° C (= carbonic snow) and — 196° C (= liquid Azote) under certain conditions :

• 1°

  The use of chemical protectors among which diméthysulfoxyd (D.M.S.O.) is slightly superior to glycerine ; bothare much more efficient than glycolethylin. Concentration rate at 10 % is more advisable than 5 %, especially at —196° C.

• 2°

  The technic of concentration must be very progressive, going up by gradations, above all when using liquid Azote.

The behaviour of Trypanosomes in congelation at low temperatures is different when using species or only strains of the same species. Although preservation remains possible when respecting the above conditions, the percentages of survival are inconstant.

T. equiperdum and T. brucei are the most resistant ; then come Trypanosomes pathogenic for man as T. gambiense (Casamance, Féo and Yaoundé strains), and finally T. cruzi is far the most delicate of all.

Its fragility may be explained by a particular histochemical structure, perhaps by the A.D.N. content and the constitution of nucleotids.