Mémoire

Free-living amoebae (FLA): detection, morphological and molecular identification of Acanthamoeba genus in the hydraulic system of an haemodialysis unit in Tunisia

Les amibes libres : détection, identification morphologique et moléculaire du genre Acanthamoeba dans les circuits hydriques de l’unité d’hémodialyse de Tunisie

¹ Fungal and parasitic molecular biology laboratory, School of Medicine Sfax, Tunisia
² Nephrology Ward, Hedi Chaker Hospital, Sfax, Tunisia

^* Correspondence: Ali Ayadi. Tel./Fax: 0021674247130 – E-mail: ali.ayadi@rns.tn

Received: 26 June 2006
Accepted: 27 January 2007

Abstract

The free-living amoebae (FLA) are ubiquitous and opportunistic protozoa. They can induce human and animal diseases. The aim of our study was to detect the FLA and Acanthamoeba genus in the hydraulic system of an hemodialysis unit. It was a prospective study of 46 water samples. The first collect (23) was before cleaning and after the haemodialysis sessions and the second (23) after cleaning and before the hemodialysis sessions. Results: the morphological study enabled us to detect morphotypic diversity. The predominant morphotypes were the acanthopodial forms (29%). At the entrance of hemodialysis unit there were acanthopodial (44%) and monotactic (25%) forms; at the outlet, acanthopodial and fan-shaped forms (25% each). In addition, Acanthamoeba genus was present in 39% (1^st collect) and 18% (2^nd collect). The amplification of the FLA 18S rDNA gene was negative in only one sample localized in the last stage of water treatment unit (WTU). The amplification of the 18S rDNA (ASA.A1) Acanthamoeba gene was positive in15 samples. Conclusions: we noted that, in the hemodialysis unit, the purification techniques used in the WTU were effective, but there is a problem of water stagnation in the drain, which constitutes an appropriate condition for the biofilms formation. It is then necessary to use a filter with a low porosity (0.2 μm) at the entrance of the hemodialysis unit and if possible to change the drain

Résumé

Les amibes libres (AL) sont des protozoaires largement répartis dans la nature. Elles peuvent être pathogènes pour l’homme ou l’animal. L’objectif de notre étude a été de détecter les AL et le genre Acanthamoeba au niveau du circuit hydrique d’une unité d’hémodialyse. Cette étude prospective a porté sur 46 échantillons d’eau. La première collecte (23) a été réalisée après la séance d’hémodialyse et avant le nettoyage des appareils ; la seconde (23) avant la séance d’hémodialyse et après le nettoyage des appareils. Résultats : l’étude morphologique nous a permis de détecter une diversité morphotypique avec prédominance du morphotype acanthopodial (29 %). À l’entrée des appareils d’hémodialyse, les morphotypes ont été dominés par acanthopodial (44 %) et monotactique (25 %) ; à la sortie, par acanthopodial (25 %) et fan-shaped (25 %). Par ailleurs, le genre Acanthamoeba a été présent dans 39 % des cas (1^ère collecte) et 18 % des cas (2^ème collecte). L’amplification du gène 18S rDNA des AL n’a été négative que pour un seul échantillon. L’amplification du gène 18S rDNA spécifique d’Acanthamoeba a été positive pour 15 échantillons. Conclusion : nous avons noté que les techniques de purifications utilisées dans cette unité de traitement ont été efficaces, mais il y a un problème de stagnation d’eau dans la canalisation, favorisant ainsi la formation des biofilms. Il est donc nécessaire d’utiliser un filtre dont la porosité est inférieure à 0.2 μm à l’entrée des appareils d’hémodialyse et éventuellement de renouveler la canalisation.