Mémoire

Optimal culture conditions for the propagation of the oyster pathogen Perkinsus marinus (Apicomplexa) in protein deficient medium

Conditions optimales de culture d’un parasite d’huitre, Perkinsus marinus (apicomplexa), dans un milieu pauvre en protéine

School of Marine Science, Virginia Institute of Marine Science, College of William and Mary, Gloucester Point, Virginia, 23062, USA.

^* Correspondence : Dr Jerome La Peyre. Tel.: (804) 642-7232. - Fax : (804) 642-7186. E-mail : jlap@vims.edu.

Received: 27 January 1996
Accepted: 23 February 1996

Abstract

The protozoan, Perkinsus marinus, acclimated and proliferated in the culture medium JL-ODRP-1 without bovine serum albumin. The principal culture conditions for the optimal propagation of P. marinus in this protein deficient culture medium, were determined. The greatest growth rates of the parasite occurred at 28 °C, 661 mOsm/kg and pH 7.5. Decreasing seeding densities from 16 x 10⁵ to 1 x 10⁵ also increased growth rate. After several passages in the absence of 5 % CO₂ tension, the growth rate of P. marinus was similar to its original value in the presence of 5 % CO₂ tension. This protein deficient culture medium is ideally suited to study parasite-derived proteins since P. marinus extracellular proteins in culture supernatants were produced and were easily detected by gel electrophoresis and silver staining.

Résumé

Le protozoaire, Perkinsus marinus, s'est acclimaté et a proliféré dans le milieu de culture JL-ODRP-1 sans albumine de sérum bovin. Les conditions principales de culture pour la prolifération optimale de P. marinus dans ce milieu pauvre en protéine ont été déterminées. Le taux de croissance du parasite était maximum à une température de 28 °C, une osmolarité de 661 mOsm/kg et un pH de 7,5 ; il a été augmenté en diminuant l'inoculum de 16 x 10⁵ à 1 x 10⁵ cellules/ml. Après plusieurs passages sans pression de 5 % CO₂, le taux de croissance des cellules était similaire à sa valeur originelle avec pression de 5 % CO₂. Ce milieu de culture, pauvre en protéine, est idéal pour étudier les protéines dérivées du parasite puisque des protéines extracellulaires ont été produites et ont pu être facilement détectées après séparation électrophorétique et coloration argentique.